特點：
- 在活細胞中檢測Caspase-3并染色細胞核DNA
- 直接加入細胞培液,孵育15-30分鐘后即可檢測，無需清洗殘余染料
- 兼容使用熒光素濾光片的流式細胞儀和熒光顯微鏡。
- 可固定染色
Principle of NucView Caspase-3 Substrate Detection.
DEVD-NucView 488 Caspase-3 底物是Biotium公司開發的一系列在活細胞內實時檢測Caspase活性的NucView Caspase 底物中的第一個產品。不同于傳統的caspase酶檢測方法，Biotium 公司發明了一種創新的熒光底物設計技術，將底物的一部分連接到功能性染料上，從而使這些染料失去功能。利用這種方法設計的熒光底物在酶切之后，染料能被釋放出來恢復功能并能結合目標分子釋放熒光（圖2）。
對于DEVD-NucView 488 Caspase-3底物，Biotium 將一段帶有大量負電荷的DEVD肽連接到一種和DNA結合的染料上。這些負電荷使得該染料不能結合DNA，也就不能產生熒光（圖6）。這種底物可以快速的穿過細胞膜進入細胞質并在這里被Caspase-3剪切，從而釋放出和DNA有高親和力的染料。釋放出來的染料可以遷移進入細胞核并把細胞核染成亮綠色（圖1）。因此，這種雙功能底物讓研究人員在凋亡細胞內檢測Caspase-3活性的同時染色細胞核，顯示細胞核在凋亡過程中經歷的形態學變化。在眾多凋亡的細胞內，不同細胞可能處在不同時期并經歷著凋亡過程中的不同事件，因而研究中很
重要的一點就是能實時獨立的跟蹤這些事件，從而更好的了解事件之間的相互關系。DEVD-NucView 488 Caspase-3底物結合Biotium公司開發的其他熒光探針，是通過熒光顯微鏡和/或者流式細胞儀來研究這些不同事件的時間、空間關系的強有力工具（圖4）。
Biotium公司現提供兩種活細胞Caspase-3檢測試劑盒。產品＃30029包含DEVD-NucView 488 Caspase-3底物和Caspase-3抑制劑，足夠在流式細胞儀或熒光顯微鏡上進行至少100次實驗。產品＃30030是一種雙凋亡檢測方法試劑盒，包含DEVD-NucView 488 Caspase-3底物和用來檢測磷酸化絲氨酸（PS）轉位的紅色熒光sulforhodamine 101-annexin V，足夠在流式細胞儀或熒光顯微鏡上進行至少50次實驗。使用兩種產品的具體實驗步驟可以從Biotium網站上下載。 |
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| 圖4. 在Staurosporine誘導不同凋亡時間（分別為1小時，2.5小時和5小時）后，使用DEVD-NucView 488 Caspase-3底物孵育Jurkat細胞，并用流式細胞儀檢測Jurkat細胞Caspase-3活性。每次分析前，用DEVD-NucView 488 Caspase-3底物（10μM）孵育誘導后的細胞15分鐘。在0時刻（未用Staurosporine誘導作為對照）Caspase-3陽性細胞百分比為0％（紅色），1小時為10％（藍色），2.5小時為80％（紫色），5小時為97％（天藍色）。 | 圖5. Staurosporine誘導的Hela細胞在37℃下用1μM的DEVD-NucView 488 Caspase-3底物孵育30分鐘后用通常的3.7%甲醛固定。固定后的細胞破膜并用sulforhodamine 101-phalloidin（Texas Red-phalloidin）（#00033）染色。調亡細胞的細胞核DNA被酶反應釋放的染料染成綠色，同時所有細胞被F-actin結合的phalloidin染成紅色。 |
圖6. 用稀釋在pH7.4 TE緩沖溶液中的dsDNA滴定NucView 488 Caspase-3底物（1μM）和它的酶切產物（1μM）。用熒光酶標儀監測530nm熒光信號（475nm激發）。
訂貨信息：
| 編號 | 產品名稱/規格 | 價格（rmb） |
生產商 |
| 10402 | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in DMSO 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10403 | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in 1X PBS 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10405 | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10406 | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10407 | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10408 | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 30029 | NUCVIEW 488 CASPASE 3 ASSAY KIT 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30030 | Dual Apoptosis Assay with NucView 488 caspase-3 substrate and Texas Red-Annexin V (50 - 250 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30062 | NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis Assay Kit (100 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30067 | Dual Apoptosis Assay with NucView 488 Caspase-3 Substrate and CF594 Annexin V (50 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30072 | NucView 488 and RedDot 2 Apoptosis & Necrosis Kit (100 assays) 1KIT |
￥4186 | Biotium Inc. |
| 30073 | Dual Apoptosis Assay with NucView 488 Caspase-3 Substrate and CF640R-Annexin V (50 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 10402-T | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in DMSO 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10403-T | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in 1X PBS, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10405-T | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10406-T | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10407-T | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10408-T | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 30029-T | NUCVIEW 488 CASPASE 3 ASSAY KIT, TRIAL SIZE 1ST |
￥1288 | Biotium Inc. |